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人结肠癌细胞,HCT-15
细胞名称:人结肠癌细胞;HCT-15
组织来源:结肠癌细胞
培养条件:RPMI-1640+10%FBS
形态:贴壁;上皮细胞样
背景:细胞呈CSAp阴性(CSAp-);角蛋白阳性。
Cells-0098 HCT-8(人盲肠腺癌细胞) 500000cells/瓶
细胞名称:人盲肠腺癌细胞;HCT-8
组织来源:盲肠腺癌细胞
培养条件:RPMI-1640+10%FBS
形态:贴壁;上皮细胞样
背景:HCT-8与HRT-18是一样的。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。
Cells-0099 HEC-1-A(人子宫内膜腺癌细胞) 500000cells/瓶
细胞名称:人子宫内膜腺癌细胞;HEC-1-A
组织来源:子宫内膜腺癌细胞
培养条件:McCoy’s+10%FBS
形态:贴壁;上皮细胞样
动物细胞培养,大致的步骤是这样:
1.从动物胚胎或者一些刚出生的动物的器官或者组织上取得细胞,配制成细胞悬浮液.把细胞液放到培养瓶中,在培养箱里培养--------原代培养.
但是,不要以为这样就能一直无限培养下去.
因为人结肠癌细胞,HCT-15在那个瓶壁上生长的时候,如果大量增殖,细胞之间会彼此相碰,细胞细胞就会停止分裂增殖,出现一种接触抑制.
2.我们为了它们能继续增殖,就用胰蛋白酶再把它们分开,然后再配制成细胞悬浮液,分开装到好几个瓶子里继续培养--------传代培养.
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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