培养液pH值变化太快 

可能原因

建议解决方法

1.CO2张力不对

按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度，2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。

2.培养瓶盖拧得太紧

松开瓶盖1/4圈。

3.NaHCO3缓冲系统缓冲力不足

改用不依赖CO2培养液。加HEPES缓冲液至10到25mM终浓。

4.培养液中盐浓度不正确

在CO2培养环境中改用基于Earle′s盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hanks人急性淋巴白血病细胞，CCRF-CEM通过STR盐配制的培养液。

5.细菌、酵母或真菌污染

丢弃培养物，或用抗生素除菌。

 培养细胞死亡 

可能原因

建议解决方法

1. 培养箱内无CO2

检测培养箱内CO2

2. 培养箱内温度波动太大

检查培养箱内温度

3. 细胞冻存或复苏过程中损伤

取新的保存细胞种

4. 培养液渗透压不正确

检测培养液渗透压。注意：大多数哺乳动物细胞能耐人急性淋巴白血病细胞，CCRF-CEM通过STR受渗透压为260– 350   mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压。

5. 培养液种有毒代谢产物堆积

换入新鲜培养液